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干細(xì)胞移植治療脊髓損傷的臨床試驗

脊髓損傷(SCI)主要由交通事故、跌倒和運動相關(guān)損傷等嚴(yán)重外傷引起,全世界有超過 100 萬患者患有 SCI 相關(guān)癱瘓。隨著社會老齡化進(jìn)程的加快,老年SCI患者因低能量跌倒而增多。SCI 不僅會導(dǎo)致運動功能缺陷,例如癱瘓,還會導(dǎo)致許多其他嚴(yán)重的醫(yī)療問題,包括呼吸系統(tǒng)、泌尿生殖系統(tǒng)和皮膚問題(圖1) 。除了嚴(yán)重的醫(yī)療問題外,SCI患者通常都很年輕,需要更長時間的醫(yī)療和社會護(hù)理,導(dǎo)致嚴(yán)重的社會經(jīng)濟(jì)問題,不僅對患者及其護(hù)理人員,而且對社會也是如此。

因此,人們熱切期待開發(fā)創(chuàng)新的SCI治療方法。然而,在SCI動物模型中產(chǎn)生積極結(jié)果的各種藥物,包括甲潑尼龍琥珀酸鈉、納洛酮、甲磺酸替拉扎特和尼莫地平,在人體臨床試驗中均未顯示出有益效果。這種失敗通常歸因于SCI涉及多種類型的細(xì)胞損傷,這些損傷會隨著時間的推移而變化,這使得單一藥物難以充分減輕損傷。在這種情況下,干細(xì)胞療法引起了人們的極大興趣,因為它們提供了多種恢復(fù)機制來改善SCI相關(guān)損傷。世界范圍內(nèi)開展了大量關(guān)于干細(xì)胞治療脊髓損傷的實驗研究和臨床試驗。

干細(xì)胞移植治療脊髓損傷的臨床試驗

2020年6月2日,北海道大學(xué)在國際期刊《International Journal of Molecular Sciences》上發(fā)布了一篇《干細(xì)胞治療脊髓損傷的臨床試驗》的研究結(jié)果。

本綜述簡要總結(jié)了SCI的病理生理學(xué)和干細(xì)胞的治療潛力,并回顧了已發(fā)表的臨床試驗,及都有哪些干細(xì)胞可以移植治療脊髓損傷。

圖1:脊髓損傷 (SCI) 后的系統(tǒng)性醫(yī)療問題。

SCI可導(dǎo)致運動功能缺陷的癱瘓和痙攣增加。
感覺障礙包括損傷平面以下的嚴(yán)重鎮(zhèn)痛和異常性疼痛。
SCI 還可以通過導(dǎo)致抑郁癥和可能的自殺來影響患者的精神。
需要治療循環(huán)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和泌尿生殖系統(tǒng)的損傷,以及皮膚問題。

脊髓損傷的病理生理學(xué)和治療靶點

SCI包括兩種截然不同的機制。一種是脊髓受壓挫傷引起的原發(fā)性損傷,導(dǎo)致?lián)p傷時神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞膜的損傷以及微血管系統(tǒng)的破壞。另一種是繼發(fā)性損傷級聯(lián),包括出血和水腫引起的組織腫脹、炎癥、細(xì)胞毒性自由基和興奮性毒性物質(zhì)的產(chǎn)生以及過度神經(jīng)膠質(zhì)增生,其發(fā)展需要數(shù)小時至數(shù)月。常規(guī)進(jìn)行超早期手術(shù)干預(yù),包括脊髓減壓和脊柱固定,但通常很難從SCI中完全恢復(fù),因為原發(fā)性損傷在受傷時已經(jīng)發(fā)生。因此,目前脊髓損傷治療的主要目標(biāo)是減少或停止繼發(fā)性損傷級聯(lián),繼發(fā)性損傷級聯(lián)可分為急性(數(shù)日內(nèi))、亞急性(數(shù)日至6個月)和慢性(>6個月)相 (圖2)。

圖2:脊髓損傷 (SCI) 的病理生理學(xué)。
二次損傷可分為急性(數(shù)日內(nèi))、亞急性(2天至6個月)和慢性(6個月以上)三個階段。

干細(xì)胞移植治療脊髓損傷的作用機制

已經(jīng)付出了廣泛的努力來闡明干細(xì)胞移植治療脊髓損傷的作用模式,并且已經(jīng)發(fā)表了多篇描述性評論。已顯示移植細(xì)胞在SCI的不同階段發(fā)揮各種神經(jīng)和血管保護(hù)作用。這些細(xì)胞不僅重組神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò),而且具有減少局部和全身炎癥、支持軸突再生和突觸萌芽以及減少神經(jīng)膠質(zhì)疤痕的能力。

這些機制可以細(xì)分為三種不同的機制:細(xì)胞替代(細(xì)胞分化)、功能多能性(護(hù)理效應(yīng))和干細(xì)胞再生??梢酝ㄟ^將移植細(xì)胞分化為神經(jīng)元或血管細(xì)胞來補償喪失的功能來實現(xiàn)細(xì)胞替代。功能性多能性描述了移植細(xì)胞分泌的各種營養(yǎng)因子,這些因子有助于改善神經(jīng)元損傷或再生新的神經(jīng)元回路。干細(xì)胞再生也發(fā)生在脊柱中,其中移植的細(xì)胞激活宿主神經(jīng)元干細(xì)胞的再生。

干細(xì)胞移植治療脊髓損傷的臨床試驗

已發(fā)表的臨床試驗列于表格1并分為急性、亞急性和慢性。一些研究在單個試驗中同時包括亞急性和慢性患者,在這些情況下,患者根據(jù)治療時間進(jìn)行分組。

參考編號雜志PMID作者國家細(xì)胞類型細(xì)胞類型劑量路線患者類型患者編號患者特征(亞洲:AD 或其他)主要功能成果主要不良事件
[ 12 ]細(xì)胞移植29871514中國同種異體UMSC&腳手架4 × 10 7脊柱上急性2個一種100% 亞洲改善 (C:2)
[ 13 ]細(xì)胞移植17269439西科娃捷克共和國。自體的BMMNC1.0 × 10 10動脈亞急性5個甲:4,乙:1亞洲改善 40%
[ 13 ]細(xì)胞移植17269439西科娃捷克共和國。自體的BMMNC1.0 × 10 10靜脈的亞急性9一個:7,乙:2ASIA 沒有改善,SEP/MEP 有一些改善
[ 14 ]細(xì)胞療法19903102朋友印度自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞6 × 10 7 /公斤熱能亞急性15A11、C4沒有得到改善
[15]臨床神經(jīng)外科。22464434卡拉穆茲安伊朗自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞7–12 × 10 6熱能亞急性11一種亞洲改善 46% (C:5),控制 15%
[ 16 ]細(xì)胞療法26971680薩蒂巴基斯坦自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞1.2 × 10 6熱能亞急性3個一種安全的
[ 17 ]脊髓醫(yī)學(xué)雜志26208177赫爾韓國自體的AMCS9 × 10 7熱能亞急性3個A2, B1ASIA 感覺變化(改善2,下降1)
[ 18 ]干細(xì)胞17464087韓國自體的BMMNC2 × 10 8亞急性35一種亞洲改善 19%(控制 8%)33% 的患者出現(xiàn)新的疼痛
[ 19 ]神經(jīng)可塑性26568892韓國同種異體國家安全委員會1 × 10 8亞急性19答:17,乙:2亞洲改善 26%(A 到 B:1,A 到 C:2,B 到 D:2)
[ 20 ]神經(jīng)外傷雜志28225648安德森美國自體的許旺細(xì)胞5、10 和 15 × 10 6亞急性6個一種FIM 和其他方面的改進(jìn)
[ 21 ]神經(jīng)外科30180779列維美國同種異體國家安全委員會4 × 10 7亞急性1個改善運動評估
[ 22 ]Br J 神經(jīng)外科雜志21749185巴諾特印度自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞書脊:6 至 24 × 10 7;膜:6 至 12 × 10 7脊柱和脊柱亞急性2個一種沒有得到改善
[ 23 ]細(xì)胞移植19364066格夫納厄瓜多爾自體的CD34+4 × 10 8脊髓、鞘膜和靜脈亞急性3個一種亞洲改善 67% (C:2)
[ 24 ]細(xì)胞療法16793729莫維利亞阿根廷自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞5 至 10 × 10 9靜脈的慢性的2個不適用電機/SEP 恢復(fù)沒有任何
[ 25 ]牛實驗生物醫(yī)學(xué)18214319切爾內(nèi)赫俄羅斯自體的BMMNC3.6 × 10 7靜脈和脊髓慢性的18不適用與對照相比,原始比例有所提高
[ 13 ]細(xì)胞移植17269439西科娃捷克共和國。自體的BMMNC1.0 × 10 10動脈慢性的1個C0% ASIA 改善,一些 SEP/MEP 改善
[ 26 ]脊髓19333245克里斯坦特巴西自體的CD34+1.5 × 10 8動脈慢性的29完全的SEP 回收率 (67%)
[ 13 ]細(xì)胞移植17269439西科娃捷克共和國。自體的BMMNC1.0 × 10 10靜脈的慢性的5個甲:4,乙:10% ASIA 改善,一些 MEP 改善
[ 27 ]干細(xì)胞開發(fā)21303266韓國自體的美國超導(dǎo)公司4 × 10 8靜脈的慢性的8個甲乙亞洲改善 12.5%(A 到 C:1)沒有SAE
[ 14 ]細(xì)胞療法19903102朋友印度自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞6 × 10 7熱能慢性的10A9、C10% ASIA 改善,一些運動/感覺改善
[ 28 ]Neurorehabil 神經(jīng)修復(fù)20660620基什克埃及自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞3–6 × 10 7熱能慢性的43A:40, C:3亞洲改善 30%(對照 16%)神經(jīng)性疼痛 24/43
[ 29 ]細(xì)胞移植22507680弗羅洛夫俄羅斯自體的CD34+24–51 × 10 6熱能慢性的20不適用SEP/MEP 改進(jìn) (15–20%)
[ 30 ]細(xì)胞移植23452836埃爾凱爾埃及自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞1.2 × 10 8熱能慢性的50甲:15,乙:35亞洲改善 34%(對照 0%)
[ 16 ]細(xì)胞療法26971680薩蒂巴基斯坦自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞1.2 × 10 6熱能慢性的6個一種安全的
[ 17 ]脊髓醫(yī)學(xué)雜志26208177赫爾韓國自體的AMCS9 × 10 7熱能慢性的11A10, D1ASIA感官變化(改善8)
[ 31 ]細(xì)胞療法28089079牧童西班牙自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞120×10 6熱能慢性的10乙:4,丙:5,?。?亞洲得分提高
[ 32 ]細(xì)胞療法29853256牧童西班牙自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞3 × 10 8熱能慢性的11A3: B:4, C:3, D:1亞洲改善 27%
[ 33 ]脊髓醫(yī)學(xué)雜志16859223利馬西班牙自體的嗅粘膜不適用慢性的7一種亞洲改善 29%(A 到 C:2)感覺惡化:1
[ 34 ]18689435麥凱辛西班牙自體的嗅粘膜1.2–2.8 × 10 7慢性的3個一種無功能改進(jìn)
[ 35 ]神經(jīng)科學(xué)快報18662744薩貝里伊朗自體的許旺細(xì)胞3–4.5 × 10 6慢性的4個A:2, C:2亞洲改善 25%(1:C 到 D)
[ 36 ]細(xì)胞療法18615345德達(dá)火雞自體的CD34+1 × 10 7慢性的9一種100% 亞洲改善 (B:2, C:7)
[ 37 ]Neurorehabil 神經(jīng)修復(fù)19794133利馬西班牙自體的嗅粘膜不適用慢性的20甲:15,乙:555% 亞洲改善(A 到 B:2,A 到 C:6,B 到 C:3)
[ 38 ]腦資源23948102傣族中國自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞2 × 10 7慢性的20一種亞洲改善 45%(A 到 B:9)
[ 39 ]干細(xì)胞研究25406723門東卡巴西自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞4–52 × 10 6慢性的12一種亞洲改善 58% (B:6, C:1)
[ 40 ]醫(yī)學(xué)翻譯雜志25209445中國同種異體UMSC4 × 10 7慢性的10一種ASIA 評分改善(細(xì)胞:70%,康復(fù):36%,對照:0%)
[ 41 ]細(xì)胞療法29784434牧童西班牙自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞3 × 10 8慢性的6個A:3, B:2, D:1亞洲得分提高
[ 42 ]細(xì)胞干細(xì)胞29859175柯蒂斯美國同種異體國家安全委員會1.2 × 10 6慢性的4個一種肌電改善
[ 43 ]神經(jīng)外科30180779列維美國同種異體國家安全委員會2 × 10 8和 4 × 10 8慢性的24一個,乙改善運動評估
[ 44 ]細(xì)胞移植25372344祖比美國自體的CD34+7.6 × 10 7脊柱和脊柱慢性的19一種亞洲改善 47%(B??:7,C:2)
[ 22 ]Br J 神經(jīng)外科雜志21749185巴諾特印度自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞書脊:6 至 24 ×10 7;膜:6 至 12 × 10 7脊柱和脊柱慢性的11一種亞洲改善 9%(A 到 B:1)
[ 45 ]神經(jīng)外科22127044公園韓國自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞書脊:8 × 10 6;膜:4 × 10 7脊柱和脊柱慢性的10甲:4,乙:6SEP/MEP 改進(jìn) (30%)
[ 46 ]神經(jīng)外科26891377韓國自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞書脊:1.6 × 10 7;膜:3.2 × 10 7脊柱和脊柱慢性的20原始比例改進(jìn) (13%)
[ 47 ]細(xì)胞療法27311799牧童西班牙自體的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞書脊:5 至 150 × 10 6;膜:30 × 10 6脊柱和脊柱慢性的12一種亞洲改善 33% (B:3, C:1)
[ 23 ]細(xì)胞移植19364066格夫納厄瓜多爾自體的CD34+4 × 10 8脊髓、鞘膜和靜脈慢性的5個A2、B1、C2亞洲改善 75%
[ 48 ]臨床移植20353375庫馬爾印度自體的BMMNC3–5 × 10 8熱能不適用264A:233, B:7, C:22, D:亞洲改善 30%
[ 70 ]細(xì)胞移植22507683夏爾馬印度自體的BMMNC1 × 10 6 /公斤熱能不適用4個不適用亞洲改善 25%

大多數(shù)臨床試驗處于早期階段(1/2 期),這些試驗主要針對嚴(yán)重受傷 (ASIAA) 的慢性期(>6個月)患者。這個決定似乎是可以理解的,因為現(xiàn)階段沒有其他有效的治療方法可以治療危重癥患者。經(jīng)常使用間充質(zhì)基質(zhì)/干細(xì)胞 (MSC),并且通常選擇骨髓作為供體來源。自體細(xì)胞比同種異體細(xì)胞更常用,這可能是由于早期試驗中遇到的安全問題。給藥途徑因試驗而異,但一般而言,鞘內(nèi)和脊柱內(nèi)給藥優(yōu)于靜脈內(nèi)或動脈內(nèi)給藥。

脊髓損傷急性期

鑒于大多數(shù)動物臨床前實驗是在急性期(受傷后24小時內(nèi))進(jìn)行的,缺乏急性期臨床試驗有些令人驚訝。在急性期,不可能獲得足夠的自體細(xì)胞,因為它們需要數(shù)周的時間才能擴增。肖等報道了在急性期患者身上使用同種異體臍帶來源的MSCs,他們在受傷后約24小時使用膠原支架將細(xì)胞移植到脊髓上。兩名完全損傷 (ASIAA) 患者報告功能恢復(fù),顯示恢復(fù)至不完全損傷 (ASIAC)。然而,在SCI的急性期,自發(fā)恢復(fù)是可能的,干細(xì)胞治療的結(jié)果必須進(jìn)一步檢查并與對照患者的結(jié)果進(jìn)行比較。

脊髓損傷的亞急性期

在這篇綜述中,我們將亞急性期定義為SCI后2天至6個月的時期。自體MSCs最常用于亞急性期患者;然而,也對從胎兒獲得的同種異體神經(jīng)元干細(xì)胞進(jìn)行了檢查。干細(xì)胞治療的結(jié)果因試驗而異,一組試驗報告沒有顯著恢復(fù),而另一組試驗報告說, 46%的ASIAA患者在接受鞘內(nèi)骨髓治療后恢復(fù)到ASIAC。衍生的間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(BMSC)注射液相對于對照組只有15%。值得注意的是,Yoon等人發(fā)現(xiàn)當(dāng)患者在受傷后8周內(nèi)接受治療時,脊柱內(nèi) BMMNC 注射有效(ASIA 改善:30%),而在受傷后8周以上進(jìn)行移植時無效(0%)。此外,他們報告說治療結(jié)果高于匹配對照(ASIA改善:7.6%)。在同一試驗中比較了移植途徑,據(jù)報道動脈內(nèi)注射比靜脈內(nèi)注射 (1.0×1010BMMNC) 的功能恢復(fù)更好。

脊髓損傷慢性期

大多數(shù)臨床試驗是在慢性期進(jìn)行的,此時自發(fā)康復(fù)的希望微乎其微。不同試驗的結(jié)果各不相同,有些試驗顯示ASIA損傷量表沒有改善,而其他試驗報告的恢復(fù)率高達(dá)100%。然而,沒有報告ASIA損傷量表測量的恢復(fù)的研究仍然顯示在其他測試中有一定程度的改善,例如SEP或MEP。此外,一些報告分析了匹配對照患者,據(jù)報道干細(xì)胞治療組的恢復(fù)率更高。

Cheng等人的一項隨機研究。 將34名ASIA A級SCI患者隨機分為三組(細(xì)胞移植組、康復(fù)組和對照組),發(fā)現(xiàn)只有細(xì)胞移植組與治療前相比,在運動、感覺和泌尿方面有顯著恢復(fù)。

El-kheir等人將70名患者隨機分為治療組和對照組,據(jù)報道,接受鞘內(nèi)BMSC移植的患者中有34%的 ASIA 損傷量表有所改善。

治療脊髓損傷的干細(xì)胞類型有哪些

許多干細(xì)胞類型,包括MSCs、嗅鞘細(xì)胞 (OECs)、雪旺氏細(xì)胞、少突膠質(zhì)祖細(xì)胞 (OPCs)、神經(jīng)干細(xì)胞 (NSCs)、胚胎干細(xì)胞 (ESCs) 和誘導(dǎo)多能干細(xì)胞 (iPSCs)作為有前途的細(xì)胞來源進(jìn)行了深入研究,并在臨床試驗中進(jìn)行了測試。

MSC和MNC

MSCs已經(jīng)證明它們能夠通過免疫調(diào)節(jié)、促血管生成信號、神經(jīng)營養(yǎng)因子分泌和神經(jīng)分化來改善組織損傷和促進(jìn)功能恢復(fù),這些結(jié)果鼓勵了使用MSCs治療SCI的大量臨床前實驗。MSCs 比其他干細(xì)胞有幾個優(yōu)勢。此外,MSC具有相對較低的致瘤性風(fēng)險,并且不存在倫理問題。大多數(shù)已發(fā)表的臨床試驗使用BMSCs或BMMNCs,很少使用其他來源的MSCs或MNCs,例如臍帶或脂肪(表格1)。使用自體脂肪組織來源的間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞 (CELLTOP) 的I期臨床試驗正在進(jìn)行中,初步報告顯示第一位患者的結(jié)果良好,沒有安全問題。

造血干細(xì)胞

表達(dá)CD34以及來自骨髓和外周血的造血干細(xì)胞也相對頻繁地用于SCI治療的臨床試驗。由于造血細(xì)胞作為骨髓移植抗白血病的供體來源有著悠久的歷史記錄,明確的方法和經(jīng)過驗證的長期安全性是其使用的主要優(yōu)勢。

OECs

OECs圍繞著嗅覺神經(jīng)元,推測它們的功能是清除中樞神經(jīng)系統(tǒng) (CNS) 和鼻粘膜之間邊界周圍的病原體和碎片。此外,據(jù)報道它們表達(dá)促進(jìn)嗅覺再生的神經(jīng)營養(yǎng)因子。OECs可以從鼻粘膜和嗅球中獲取并移植到脊髓中。臨床試驗證明了OEC移植治療SCI的安全性和可行性,根據(jù)薈萃分析報告的嚴(yán)重不良事件沒有增加;然而, OEC在此應(yīng)用中的功效被認(rèn)為是有限的。

神經(jīng)干細(xì)胞

NSC 是自我更新的多能祖細(xì)胞,能夠分化為神經(jīng)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞。雖然這些細(xì)胞主要存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的胎兒發(fā)育階段,但它們也存在于數(shù)量有限的其他區(qū)域,例如腦室旁的腦室下區(qū)和成人大腦中的脊髓中央管。NSCs通過促進(jìn)少突膠質(zhì)細(xì)胞存活和軸突內(nèi)鞘提供神經(jīng)保護(hù)作用。已經(jīng)報道了幾項使用NSC的臨床試驗,其中一個問題涉及公司贊助的臨床試驗的提前終止。Stem Cells Inc.啟動了一項臨床試驗,顯示出一定程度的運動改善;但出于商業(yè)考慮,試驗提前終止。這是功能恢復(fù)、成本效益和利潤方面的重要一課。

胚胎干細(xì)胞

ESC具有多能性,被認(rèn)為是治療 SCI 最有前途的細(xì)胞來源之一。ESC 可以在體外條件下分化成多種細(xì)胞類型,包括神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞,并有可能替代 SCI 中受損的神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。然而,根據(jù)定義,胚胎干細(xì)胞需要從胚胎細(xì)胞中獲取,這引發(fā)了重大的倫理問題。Geron Corporation 于 2010 年啟動了針對 SCI 的基于人類ESC的療法的I期臨床試驗,但表面上出于經(jīng)濟(jì)考慮,他們宣布他們將在移植計劃的 10 名患者中的4名患者后停止臨床試驗,以及該試驗的結(jié)果還沒有被釋放。

iPS細(xì)胞

從患者身上采集的iPSC可能不需要免疫抑制劑治療,并成功避免了與ESC采集相關(guān)的倫理問題;然而, iPSC的致瘤性尚未完全了解。多種細(xì)胞類型,例如NSC和MSC,已從iPSC分化并移植到SCI動物模型中。日本研究人員宣布他們即將開始使用iPSC進(jìn)行臨床試驗。

結(jié)論

干細(xì)胞表達(dá)和分泌多種生物因子,參與抗炎,免疫調(diào)節(jié),神經(jīng)營養(yǎng)和血管生成作用,可通過提供修復(fù)損傷的細(xì)胞因子,促進(jìn)脊髓受損組織修復(fù),或防止損傷進(jìn)一步加重;促進(jìn)脊髓損傷空洞區(qū)形成橋接,引導(dǎo)神經(jīng)再生、調(diào)節(jié)免疫微環(huán)境等。同時,干細(xì)胞還能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子,促進(jìn)血管再生,抑制炎性反應(yīng)。

希望隨著醫(yī)學(xué)的進(jìn)步,在不久的將來,脊髓損傷患者的治療不再僅依賴于支持性護(hù)理,而是能有更多干細(xì)胞治療手段,為處于絕望邊緣的患者帶來新生!

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